附錄(五) 分光光度計使用說明
普化實驗室目前使用的分光光度計雖有數種不同廠牌型號,但操作與校正程序相同:
開啟電源、暖機 → 選擇偵測波長 → 校正:0% T(光線穿透度為 0 )→ 校正:100% T, 0 A(光線穿透度為 100% 或吸收度為 0 )→ 樣品量測
一般注意事項
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注意所使用比色槽種類是否正確;
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除放置、取出比色槽外,樣品室蓋子需蓋上;
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開機後需暖機15分鐘,方可進行校正與實驗;
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樣品室保持清潔、乾燥。對比色槽添加或吸取液體需在儀器外進行,嚴禁在樣品室內進行;
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比色槽放入樣品室前需確認外壁無任何液體與灰塵附著;
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若改變偵測波長,需重新進行校正;
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注意儀器數據顯示模式(T-穿透度、A-吸收度)。
實驗多為量測樣品吸收度,因此校正後無須再切換模式,將空白樣品取出,換上待測樣品即可獲得其吸收度數據。
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使用後務必將比色槽取出。若樣品室內有液滴或髒汙,也務必清理乾淨。
以下以 Spectronic 20D+ 以及 ChromTech V-1100 兩種機型為例,說明儀器操作方法。
ChromTech V-1100
儀器外觀
本機型需使用方形比色槽
校正程序:
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調整「波長調整鈕」至所需波長。
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按「MODE」鍵切換至 T 模式,利用「樣品架切換桿」將樣品室中內建之黑色長方柱移至偵測位置,擋住光徑。按「 Δ / 0% 」鍵將顯示之穿透度值歸零。
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將裝有空白溶液(實驗使用不含分析物之溶液)的比色槽放入樣品室,利用「樣品架切換桿」將其移至偵測位置。按「MODE」鍵切換至 A模式,按「 ∇ / 100%T 」鍵使螢幕顯示之吸收度值歸零。
Spectronic 20D+
儀器外觀
本機型需使用專用試管狀比色槽,不可使用一般方形比色槽或普通試管。試管型比色槽內徑為 1 cm,管口繪有白色標示,使用後請還給助教,切勿和普通試管混淆。
校正程序:
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將「波長範圍選擇桿」切換至所需波長範圍,再調整「波長調整鈕」至所需波長。
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按「模式選擇鈕」切換至 T模式,確認樣品室中沒有比色槽(儀器設計在無比色槽時會自動將光徑遮住)。調整「 0%T調整鈕 」將顯示之穿透度值歸零。
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將裝有空白溶液(實驗使用不含分析物之溶液)的比色槽放入樣品室。按「模式選擇鈕」鍵切換至 A模式,調整「100%T / 0A調整鈕」將顯示之吸收度值歸零。